Avaliação do efeito da doxiciclina sobre a diferenciação osteogênica in vitro de células tronco mesenquimais da medula óssea de ratas

Resumo: A utilização de células tronco tem sido continuamente explorada devido seu potencial na medicina regenerativa, inclusive em doenças ou defeitos ósseos. Estudo verificou que a doxiciclina foi capaz de reverter parcialmente o quadro de osteopenia em ratas com osteoporose induzida por meio de ovariohisterectomia precoce e em ratas sedentárias. No entanto, não se sabe se a doxiciclina poderia ter efeito sobre a diferenciação osteogênica de células tronco mesenquimais da medula óssea (CTM-MO). Assim, o objetivo deste projeto será avaliar o efeito da doxiciclina sobre a diferenciação osteogênica in vitro de CTM-MO de ratas. Serão utilizadas quatro ratas Wistar (2 meses de idade) que serão eutanasiadas com sobredose de anestesia e seus ossos longos serão colhidos e submetidos à extração das CTM-MO que serão cultivadas em meio de indiferenciação para avaliação da viabilidade celular pela coloração pelo azul de Tripan. Posteriormente, serão cultivadas em meio de diferenciação osteogênica, acrescido ou não de doxiciclina (1g/ml, 5g/ml, 10g/ml e 25g/ml). Serão constituídos cinco grupos experimentais: 1) CTM-MO sem adição de doxiciclina; 2, 3, 4, 5) CTM-MO acrescidas de 1g/ml, 5g/ml, 10g/ml e 25g/ml de doxiciclina, respectivamente. Após sete, 14 e 21 dias de diferenciação serão avaliados: viabilidade celular, formação de nódulos de mineralização, atividade da fosfatase alcalina, análise morfométrica, e expressão gênica de colágeno I, osteocalcina, sialoproteína óssea, osteopontina e BMP-2. Os dados serão comparados pelo teste Student-Newman-Keuls (SNK), com significância estabelecida para p ≤ 0,05. Todos os procedimentos experimentais serão executados segundo as recomendações e a aprovação da Comissão de Ética no Uso de Animais (CEUA) da Universidade Federal do Espírito Santo.

Data de início: 02/08/2021
Prazo (meses): 48

Participantes:

Papel	Nome
Coordenador	JANKERLE NEVES BOELONI